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當(dāng)您實(shí)驗(yàn)ELISA試劑盒出現(xiàn)負(fù)值時(shí)

2025-10-13 [266]

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)假如按上訴方法處理后查看仍有負(fù)值,則處理數(shù)據(jù)時(shí)可以選用2個(gè)方法:這即是在咱們的說(shuō)明書(shū)中主張查看血清時(shí)做1:2稀釋的要素。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)只取標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的下面4~5個(gè)點(diǎn),即125,62.5,31.25,15.625,7.8,0,或62.5,31.25,15.625,7.8、3.9、0。

除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外,其它一些細(xì)胞因子都要做1:2稀釋?zhuān)ㄟ@在咱們的說(shuō)明書(shū)中有提示)。

做法是:先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液(試劑盒中已備),再加50ul樣本。

ELISA試劑盒人為的把“0"pg/ml點(diǎn)OD值降低。原則是把“0"OD值降到比zui低的樣本OD略低一點(diǎn),盡可能使樣本的含量滿(mǎn)是正值,一同確保改動(dòng)“0"OD值后的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)(r)>0.98。

求出樣本含量后需求乘上稀釋倍數(shù)2。

原則是把樣本的OD值全包括,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)又能至少有4個(gè)點(diǎn)。也即是把標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的下端(即樣本含量會(huì)合的這一段)拓寬,求出的數(shù)據(jù)更可靠。

這么改動(dòng)后,一般樣本都能得到數(shù)據(jù),低的樣本出來(lái)了,高的樣本含量也會(huì)高一些。

因?yàn)楹怂銜r(shí)是相對(duì)含量的比照,所以不會(huì)影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)核算效果。

ELISA試劑盒血清中有些細(xì)胞因子的檢出率很低,血清中又富含很多大分子雜蛋白,在血清濃度較高時(shí)簡(jiǎn)略隱秘抗原的表位,因此在測(cè)血清原液經(jīng)常出現(xiàn)負(fù)值。

研域(上海)化學(xué)試劑有限公司總部設(shè)在上海,公司專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、實(shí)驗(yàn)室消耗品等,我們致力于向國(guó)內(nèi)外生命科學(xué)研究人員提供的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。

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